一、概述
氨基酸是蛋白质的构成单位,几乎存在于所有含蛋白质的物质中。氨基酸检测的基本原理主要包括样品的预处理、氨基酸的分离和定量三个步骤。通常,样品首先经过水解处理,将蛋白质分解成单一的氨基酸分子。随后,利用高效液相色谱(HPLC)、氨基酸自动分析仪法等技术,将不同的氨基酸进行分离和检测。通过与已知浓度的标准品进行比对,可以得出样品中各类氨基酸的含量。这一系列步骤需要高精度的仪器设备和严格的操作流程,以确保检测结果的准确性和复现性。
二、检测服务列表
序号 | 指标 | 检测方法 |
1 | 脯氨酸 | 茚三酮比色法 |
2 | 羟脯氨酸(胶原蛋白) | 氯胺T比色法 |
3 | 游离氨基酸总量 | 茚三酮比色法 |
4 | 游离氨基酸组分 | 高效液相色谱法 |
5 | 17种水解氨基酸组分 | 高效液相色谱法/氨基酸自动分析仪法 |
6 | γ-氨基丁酸 | 高效液相色谱法 |
7 | 茶氨酸 | 高效液相色谱法 |
三、检测方法
1、全自动氨基酸测定仪方法
氨基酸可以采用全自动氨基酸分析仪来测定,这是近年来测定氨基酸应用最为普遍的一种分析方法。它是由高效液相色谱柱后衍生技术发展而来,原理是在阳离子交换柱上对各组分进行分离,接着通过酸性缓冲液将各组分洗脱,再让柱后流出液与茚三酮混合共热反应,生成具有可见光吸收的蓝紫色产物再进行检测,这种方法具备仪器稳定性高、操作简便、结果重复性良好和可靠等优点。氨基酸自动分析仪所需的样品分析用量小,可以分析的氨基酸种类多,适用于大多数有条件的实验室,而且衍生剂不直接进入柱子,可以延长柱子的寿命。但是传统的盐酸前处理水解时间要 22 h,耗时长,消耗的能量多,柱后衍生法的反应条件要求又高,流动相配置复杂, 国内主要采用进口仪器,成本昂贵,导致分析费用较高。目前,氨基酸分析仪广泛应用于食品、粮食、饲料的氨基酸检测等方面。
2、高效液相色谱法
HPLC是目前应用最为广泛的氨基酸检测技术之一。它通过在柱中利用不同氨基酸在色谱固定相和流动相中的不同亲和性,实现氨基酸的分离。检测过程中,常配合衍生化反应,将氨基酸转化为具有强吸收或荧光特性的衍生物,从而提高检测的灵敏度。HPLC具有操作相对简便、灵敏度高、检测速度较快等优点,广泛应用于食品、饲料等行业的氨基酸分析。
四、标准谱图

五、实验流程
