单糖组成

品泰生物

一、概述

单糖作为多糖的基本结构单元，其组成（种类、比例）直接决定了多糖的分子结构、理化性质（如溶解性、黏度）及生物活性（如免疫调节、抗氧化），是多糖结构解析、构效关系研究的核心基础。测定单糖组成常用的方法有三种：高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）和高效阴离子交换色谱安培检测法（HPAEC-PAD）。由于HPLC和GC法用于单糖组成操作复杂、精确度低、周期长，往往需要对单糖进行柱前衍生，容易产生异构体，误差较大。HPAEC-PAD法凭借灵敏度高、短时高效、及操作简单以及重复性好等优点成为目前单糖组成分析主流方法。

二、检测列表

No.	Name	Name	Concentration(mg/L)	RT	Area
1	岩藻糖	Fuc	2.5	5.934	9.319
2	氨基半乳糖盐酸盐	GalN	2.5	11.684	13.16
3	鼠李糖	Rha	2.5	12.35	7.289
4	阿拉伯糖	Ara	1.875	13.4	10.963
5	盐酸氨基葡萄糖	GlcN	2.5	14.959	25.607
6	半乳糖	Gal	2.5	17.267	7.519
7	葡萄糖	Glc	2.5	19.75	14.71
8	木糖	Xyl	2.5	23.334	10.072
9	甘露糖	Man	2.5	24.475	8.603
10	果糖	Fru	7.5	27.917	2.043
11	核糖	Rib	5	28.842	32.818
12	半乳糖醛酸	GalA	2.5	43.259	2.881
13	古罗糖醛酸	GulA	5	43.934	5.423
14	葡萄糖醛酸	GlcA	2.5	45.775	6.557
15	甘露糖醛酸	ManA	5	48.067	6.408

（注：N-乙酰-D-氨基葡萄糖在120℃的水解条件下会被分解，故混标色谱图中无法呈现。）

三、检测方法

1、高效阴离子交换色谱法：无需衍生的极性单糖检测技术

利用单糖的带电特性（如酸性单糖的羧基、氨基单糖的氨基可解离为离子），在离子交换色谱柱上实现分离，常用色谱柱为阴离子交换柱，检测器为电导检测器或安培检测器。

原理：单糖离子在离子交换柱上与固定相的离子交换基团发生竞争吸附，通过流动相（如碳酸氢钠 - 碳酸钠缓冲液）的洗脱，按离子强度差异依次洗脱；安培检测器可直接检测单糖的氧化电流，无需衍生化；

优势：无需衍生化处理，避免衍生过程中的单糖损失或污染；对极性单糖（如葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸）的分离效果优异，可有效区分单糖的异构体（如葡萄糖与甘露糖）；

2、气相色谱法(GC)：

但该方法需要衍生化才能使单糖挥发。气相色谱法可以对单糖的组成进行高质量的分析，特别是与质谱联用(GC-MS)，从而提供更好的分辨率和灵敏度。虽然质谱法可以很容易地将碳水化合物与其他有机化合物区分开来，但由于衍生单糖的高重现性，通过火焰离子化检测器(FID)定量被更频繁地用于测量衍生单糖的数量。然而，为了量化单糖，必须确保衍生化是完全的，以避免分析糖的损失或降解。此外，一些单糖如糖醛酸很难衍生化，这在某些情况下阻碍了气相色谱法的准确定量。该方法的另一个缺点是，同一单体可能呈现不同的衍生形式，从而呈现同一分子的多个光谱，使分析变得复杂。

四、标准谱图